Sắc ký là một trong những kỹ thuật phân tích quan trọng nhất hiện nay, được ứng dụng rộng rãi trong các lĩnh vực dược phẩm, thực phẩm, môi trường và hóa học. Hai mục tiêu chính của phân tích sắc ký là định tính và định lượng các thành phần có trong mẫu.
PHÂN TÍCH ĐỊNH TÍNH
Một mẫu chuẩn aspartame được phân tích và cho tín hiệu peak tại thời gian lưu 12,5 phút. Peak này tương ứng với chính hợp chất aspartame.
Tiếp theo, một mẫu được chuẩn bị từ đồ uống được phân tích trong cùng điều kiện và thu được nhiều peak khác nhau. Peak xuất hiện tại 12,5 phút có thể được xác định là peak của aspartame.
Để so sánh chính xác, các điều kiện phân tích phải được giữ nguyên, bao gồm:
- Loại pha tĩnh (vật liệu nhồi cột)
- Kích thước cột sắc ký
- Nhiệt độ cột
- Thành phần pha động
- Tốc độ dòng.
PHÂN TÍCH ĐỊNH LƯỢNG
Chiều cao peak hoặc diện tích peak tỷ lệ thuận với nồng độ của hợp chất tương ứng.
Trước tiên, đường chuẩn (calibration curve) được xây dựng bằng cách phân tích các mẫu chuẩn có nồng độ đã biết. Sau đó, nồng độ aspartame trong mẫu đồ uống được xác định thông qua diện tích peak của aspartame thu được từ phép đo.
NHỮNG LƯU Ý QUAN TRỌNG
Cần lưu ý rằng phân tích định tính luôn tồn tại một số yếu tố không chắc chắn. Có thể có các hợp chất khác cùng được rửa giải tại thời điểm tương tự aspartame, dẫn đến khả năng chồng lấp tín hiệu.
Hệ thống sắc ký lỏng (LC) và sắc ký khí (GC) thường phù hợp hơn cho việc xác định hàm lượng của một hợp chất đã biết trong mẫu, hơn là xác định bản chất của tất cả các thành phần có trong mẫu.
Đối với phân tích định lượng, việc xây dựng đường chuẩn là yêu cầu bắt buộc. Nếu không có chất chuẩn tương ứng, việc thực hiện phân tích định tính hoặc định lượng một cách chính xác sẽ rất khó khăn.
KẾT LUẬN
Phân tích định tính và định lượng là hai chức năng cốt lõi của kỹ thuật sắc ký. Trong khi phân tích định tính giúp nhận diện hợp chất có trong mẫu, phân tích định lượng cung cấp thông tin về hàm lượng của hợp chất đó. Sự kết hợp giữa hai phương pháp này giúp sắc ký trở thành công cụ không thể thiếu trong các phòng thí nghiệm hiện đại.
Bên cạnh việc cung cấp hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) chính hãng từ Hitachi, 2H Instrument còn đồng hành cùng khách hàng thông qua dịch vụ tư vấn, lắp đặt, đào tạo vận hành và hỗ trợ kỹ thuật, góp phần nâng cao hiệu quả phân tích và độ tin cậy của dữ liệu phòng thí nghiệm.
Nguồn:
Philosophy of Qualitative analysis and Quantitative analysis by chromatography
